新四军一支队司令部旧址位于南京市高淳区淳溪镇吴氏祠堂内。旧址南为固城湖官溪河，北靠高淳历史文化街区——高淳老街，是一处留存完整的清代中期古建筑。其四周均是清代古民居与商铺，具有深厚的历史文化底蕴。 

　　为开展敌后游击战争，新四军第一支队在司令员陈毅率领下，于1938年5月中旬从皖南出发，东进茅山。6月1日，新四军第一支队兵分3个纵队，从南陵出发越过敌人的铁路封锁线，3日抵达宣高边境的狸头桥。当天夜晚，陈毅率领第一支队由狸头桥登船，渡过固城湖，于4日凌晨抵达高淳县城，分驻在淳溪镇及其附近村庄。新四军一支队司令部设在吴氏祠堂内。 

　　高淳是新四军一支队东进抗日、进入苏南地域的第一站。陈毅在高淳期间，积极开展党的统一战线工作，走访国民党县长杨鼎侯和地方士绅，向他们宣传新四军的宗旨和抗日统一战线政策。6月5日，国民党高淳县政府在东平殿广场召开抗日救国民众动员大会，陈毅发表3个多小时的演说，宣传国内外形势，号召军民各界共同抗日。同时，他还深入农家了解民情，开展社会调查。6月7日，陈毅告别高淳民众，率部继续东进。 

　　新四军一支队司令部旧址是江苏省爱国主义教育基地、江苏省文物保护单位。